Рождество-Богородичный монастырь расположен на территории, где в средние века стоял Пречистенский храм — «ровесник» знаменитой Коложской церкви. Женская обитель здесь действовала с 1633 года.
В 1960 году власти выселили монахинь в Жировичи. Треть века обитель пустовала, в ее помещениях был устроен музей атеизма и истории религии.
10 мая 1992 года на заседании Святого Синода Белорусской Православной Церкви было принято решение о возрождении Гродненского Рождество-Богородичного женского монастыря и о назначении настоятельницы.
1 июля того же года, в праздник Боголюбской иконы Божией Матери, состоялось первое богослужение, которое возглавил Митрополит Минский и Слуцкий Филарет (Вахромеев), Патриарший Экзарх всея Беларуси.
14 января 1993 года был освящен восстановленный храм во имя преподобного Сергия Радонежского, причем молящиеся в этот день удостоились необычного для зимнего времени небесного знамения – во время освящения храма над монастырем появилась радуга. Спустя год после открытия монастыря, 1 июля 1993 года, монастырю был возвращен и главный собор в честь Рождества Пресвятой Богородицы. В последующие годы обители были возвращены все монастырские здания, расписан Рождество-Богородичный собор.
При монастыре действует православное сестричество, молодежная группа, работает детская воскресная школа.
Комплекс монастыря представляет собой образец позднего барокко и включает церковь Рождества Пресвятой Богородицы, церковь во имя преподобного Сергия Радонежского, жилой и хозяйственный корпуса, часовню. В главном соборе монастыря пребывает чудотворный образ Божией Матери «Владимирская», чтимый мироточивый образ преподобного Сергия Радонежского.